Prueba molecular para Diabetes Mellitus

Tema: Mutaciones negativas dominantes en el PPAR gamma humano asociadas con la resistencia a la insulina grave, diabetes mellitus y la hipertensión.

Objetivos: Encontrar las mutaciones germinales en la pérdida de la función de PPAR gamma, proporcionando evidencia científica convincente de que este receptor es importante en el control de la sensibilidad a la insulina, homeostasis de la glucosa en la sangre y la presión arterial en el ser humano.

Tipo de muestra biológica: Compleja. Sangre con anticoagulante EDTA.

Tipo de ácido nucleico: DNA genómico.

1. Lisis:
2. Física: centrifugación.
3. Químca: N-acetil L-cisteína, NaOH, método del citrato.
4. Separación: PBS.
5. Purificación: cromatografía.

Gen a amplificar: P467L, V290M y GST

Tipo de PCR: Simple
· Desnaturalización: 97°C x 45 s.
· Hibridación: 65°C x 1 min.
· Elongación: 70° C x 1 min.


Visualización: EFO

Bibliografía

Paredes M, Lizaraso F, Lissón R. Asociación del SNP19 del gen «calpaína 10» a diabetes mellitus tipo 2 y factores de riesgo en población peruana. Avances en diabetología; 2010. Disponible en: http://www.sediabetes.org/gestor/upload/revistaAvances/avances%2026_3%20web.pdf#page=50

http://www.nature.com.sci-hub.org/nature/journal/v402/n6764/full/402880a0.html