Prueba molecular para Diabetes Mellitus

Tema: Mutaciones negativas dominantes en el PPAR gamma humano asociadas con la resistencia a la insulina grave, diabetes mellitus y la hipertensión.

Objetivos: Encontrar las mutaciones germinales en la pérdida de la función de PPAR gamma, proporcionando evidencia científica convincente de que este receptor es importante en el control de la sensibilidad a la insulina, homeostasis de la glucosa en la sangre y la presión arterial en el ser humano.

Tipo de muestra biológica: Compleja. Sangre con anticoagulante EDTA.

Tipo de ácido nucleico: DNA genómico.

1. Lisis:
2. Física: centrifugación.
3. Químca: N-acetil L-cisteína, NaOH, método del citrato.
4. Separación: PBS.
5. Purificación: cromatografía.

Gen a amplificar: P467L, V290M y GST

Tipo de PCR: Simple
· Desnaturalización: 97°C x 45 s.
· Hibridación: 65°C x 1 min.
· Elongación: 70° C x 1 min.


Visualización: EFO

Bibliografía

Paredes M, Lizaraso F, Lissón R. Asociación del SNP19 del gen «calpaína 10» a diabetes mellitus tipo 2 y factores de riesgo en población peruana. Avances en diabetología; 2010. Disponible en: http://www.sediabetes.org/gestor/upload/revistaAvances/avances%2026_3%20web.pdf#page=50

http://www.nature.com.sci-hub.org/nature/journal/v402/n6764/full/402880a0.html

Pruebas de tamizaje y confirmación para Diabetes Mellitus

Se entiende por pruebas de tamizaje aquellos exámenes aplicados con el fin de identificar una población, aparentemente sana, en mayor riesgo de tener una determinada enfermedad, que hasta ese momento no se les ha diagnosticado. El esquema de tamizaje para DM2 consiste en la aplicación de dos pruebas dispuestas de manera seriada. 

*En la primera, a través del cuestionario se explora la presencia de factores de riesgo para DMT2 y la sintomatología de poliuria, polidipsia y polifagia. 

*En la segunda prueba, se miden los niveles de glucosa capilar, para finalmente, en aquellos sujetos que se consideran sospechosos de presentar la enfermedad, proceder a la confirmación diagnóstica a través de la medición de los niveles de glucosa sérica en ayuno.

Después de las pruebas de tamizaje se deben realizar pruebas diagnósticas (glucosa plasmática en ayunas (GPA) y/o una prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG)) para emitir el diagnóstico.

Bibliografía

Alvear M, Asa C. Consideraciones sobre el programa de Diabetes Mellitus en población mexicana: el caso del Distrito Federal. Río de Janeiro: Scielo; 2010. Disponible en: www.Scielo.br/pdf/csp/v26n2/09.pdf

miRNAs interferentes relacionados con Diabetes Mellitus

 

Los microARN se requieren para el desarrollo del páncreas, para la regulación de la glucosa, también intervienen en el control de las células b-pancreáticas maduras y tienen un papel especial en la diferenciación de los islotes pancreáticos. Además, participan en la regulación de la producción, secreción y acción de la insulina.

Se estudió la presencia de miR-9, miR-29a, miR-34a, miR-103, miR-222, miR-224 y miR-375 en pacientes con diabetes tipo 2 de diagnóstico reciente, individuos prediabéticos e individuos susceptibles con tolerancia normal a la glucosa. Se ha demostrado que miR-34a tuvo una diferencia significativa y la expresión de los siete microARN relacionados con diabetes estuvo elevada en forma significativa, en pacientes con diabetes comparados con los prediabéticos y con los individuos susceptibles con tolerancia normal a la glucosa.

Bibliografía

Rico M, Vega G, Oliva D. Importancia de los microARN en el diagnóstico y desarrollo de enfermedades. México: Rev Med Inst Mex; 2014 [Aceptado 27 de Enero de 2014]. Disponible en: www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2014/im143n.pdf

Alteraciones de la Epigenómica en la Diabetes Mellitus Tipo 2

El Latinoamérica, las alteraciones epigenómicas de la Diabetes Mellitus tipo 2, básicamente responden a la contradicción entre la necesidad de adaptación del feto a una alimentación materna deficiente o a una insuficiencia placentaria producto de enfermedades como la preeclampsia, y en la etapa adulta, responde al modo de vida urbano lleno de excesos alimentarios, con alto consumo de grasas saturadas, harinas, bebidas endulzadas y sedentarismo, todas estas constituyen condiciones que determinan resistencia a la insulina y DM2.

Bibliografía

López P, Rey J, Gómes D, Rodríguez Y, López J. Combatir la epidemia de diabetes mellitus tipo 2 en Latinoamérica; caractrísticas especiales que demandan acciones innovadoras. Colombia: ELSEVIER; 07 de noviembre de 2016. Disponible en: http://apps.elsevier.es/watermark/ctl_servlet?_f=10&pident_articulo=90008630&pident_usuario=0&pcontactid&pident_revista=15&ty=44&accion=L&origen=zonadelectura&web=www.elsevier.es&lan=es&fichero=15v23n02a90008630pdf001.pdf

Alteraciones de la Traducción en la Diabetes Mellitus Tipo II

Como resultado de la transcripción en la Diabetes Mellitus tipo 2 se forma un tipo de ARN, el ARN largo no codificante (long noncoding RNA o ARNlnc), este permite la aparición de las células beta del páncreas.El ARNlnc se puede considerar como un intrón, segmento que no sintetizará proteínas, en lugar de ello controla genes que se expresan en nuestras enfermedades, que determinan nuestros rasgos físicos y personalidad. Se ha demostrado que al menos uno de estos ARNlnc regula la expresión de un gen íntimamente relacionado con la Diabetes llamado GLIS3.

También se ven involucrados los micro ARN, los cuales participan en la regulación de un ARNm blanco y al inhibir su traducción se ven afectados el desarrollo del páncreas y de sus células beta, la regulación de la glucosa y la diferenciación de los islotes pancreáticos.

Bibliografía

King M. Genética de la Diabetes Tipo 2. Themedicalbiochemistrypage.org. Fecha de actualización 5 de abril de 2015. Disponible en: http://themedicalbiochemistrypage.org/es/diabetes-sp.php#type2genetics

Rico M, Vega G, Oliva D. Importancia de los microRNA en el diagnóstico y desarrollo de enfermedades. Med Inst Mex. 2014 Jan; 52(3). Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2014/im143n.pdf